厭氧培養(yǎng)箱是由真空取樣室、恒溫厭氧操作室、氣路、電路控制系統(tǒng)等部分組成。整機造型新穎、結構緊湊,具有厭氧環(huán)境好、密風性能好、溫控精度高,穩(wěn)定性好、使用方便、省氣、經(jīng)濟、工作安全可靠等優(yōu)點。其特點如下:
1.使用科學手段達到厭氧環(huán)境的高精度,其恒定性能好、使用可靠;
2.培養(yǎng)箱溫度采用微電腦控制,能準確直觀地反映箱內(nèi)溫度,能自動進行溫度再控制,是一套有效的限溫保護裝置,確保培養(yǎng)物在安全溫度環(huán)境條件下生長;
3.箱內(nèi)裝有紫外線殺菌燈,可有效地避免雜菌污染;
4.氣路裝置,可任意準確調(diào)節(jié)流量,能任意輸入各種所需氣體;
5.氣路由微電腦控制,電磁閥啟動或閉合、操作靈活;
6.操作室前窗采用厚透明特種玻璃制作,能清晰直接觀察室內(nèi)操作情況,操作使用塑膠手套可靠舒適、靈活、使用方便;
7.室內(nèi)裝有除氧催化器。
三、主要技術指標
1.取樣室形成厭氧狀態(tài)時間小于5分鐘;
2.操作室形成厭氧時間小于1小時(抽氣充氣置換);
3.操作室在停止補充微量混合氣體的情況下,厭氧環(huán)境維持時間大于10小時;
4.使用溫度:室溫+3℃~50℃;
5.培養(yǎng)室溫度波動≤±0.3℃;溫度分布均勻性≤±1.0℃;
6.操作室內(nèi)體積:820mm×550mm×660mm(長×高×寬),
7.電源220V±10%AC,功率:500VA
四、安裝
1.整機應安放在溫差較小、操作方便的位置,應避免陽光直曬和遠離采暖設備,放置平穩(wěn);
2.將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當位置;
3.接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合;
五、使用
(一)操作室厭氧環(huán)境形成:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
2.通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度;
3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);
4.關緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗;
5.操作室內(nèi)*次置換(氮氣置換):
A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
B.接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使手套鼓起,關閉閥門1,然后扎緊袋口;
6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續(xù)三次氮氣置換。
7.操作室第四次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
A.調(diào)換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關開閉排氣;
B.關掉混合氣體閥3,并打開閥5,使混合氣體經(jīng)過流量計,調(diào)整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
C.混合氣體重復2-3次轉(zhuǎn)換,經(jīng)過上述過程,基本形成厭氧環(huán)境。
8.操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開美蘭指示紙觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境;
9.開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。
(二)菌種的置入和培養(yǎng):
1.檢查取樣室內(nèi)門并關緊;
2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門;
3.取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮氣閥2進氣,使指針回復零位,關掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進混合氣,使指針回復零位,關掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結束;
4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);
5.取樣室外門開啟、關緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;
6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:
A.每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示紙觀察,如不正常就重新?lián)Q氣;
B.要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收,保證室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;
C.連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
D.操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。
7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。
六、注意事項
1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;
2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;
3.培養(yǎng)物放入是在操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境后放入;
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持10小時厭氧狀態(tài)(超過10小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);
5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;
6.調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;
真空泵按要求使用,定期檢查加油.